高效液相色谱分析茶叶及茶多酚中儿茶素

   摘要：茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以黄烷醇类物质（儿茶素）*为重要。

      ◆ 摘要

      采用VERTEX STI 5000等度和梯度高效液相色谱仪分析茶多酚中的儿茶素和***

      ◆ 前言

       茶叶中儿茶素类化合物是茶叶中含量较丰富的一类功能性活性成分，在新茶中的质量分数（以干叶计）为 1 2 %～ 3 2 %。由于具有广泛的保健和药理功效以及较强的食品抗氧化特性，茶叶中儿茶素近年来已成为医药和食品研究领域的热点之一，本文采用上海禾工VERTEX STI 5000分析茶叶及茶多酚中儿茶素，方便，准确，快速。

      ◆ 实验部分

      本实验在VERTEX STIP5000高压恒流泵、UV5000紫外可见检测器、Rheodyne 7725i高压进样阀、Vertex AQ-C18. 色谱柱上完成
     
      ◆ 色谱条件

      色谱柱： Vertex AQ-C18 5μm 4.6×200 mm

      流动相： 等强度洗脱为CH3OH-H2O-TFA（体积比为25∶75∶0.05）

      梯度洗脱的流动相A为甲醇，流动相B为体积分数为0.05%的TFA水溶液，梯度程序为22%A（4 min） 11 min40%A（6 min）4 min22%A。A的体积分数恒定在22%（即处于初始状态）平衡5 min，以便下一次进样。

      流 速： 1.0mL/min

      柱 温： 35℃

      检测波长： 278 nm或210 nm

      样 品： 西湖龙井，世纪茶多酚Ⅰ号

      标 准 品： EGC，D-C，EC，EGCG和ECG，纯度均为98%

      进样量： 20μL

      ◆ 结果与讨论图1龙井茶样在Vertex AQ-C18柱上的色谱分离图

      Fig.1 Chromatogram of Longjing Tea on Vertex AQ-C18column

      Mobile phase: methanol-water-trifluoro acetic acid （25∶75∶0.05，V/ V）； detection wavelength:278 nm； flow rate:1 mL/min；column temperature:35℃.

      Peak identification:1.EGC；2.D-C；3.EGCG；4.EC；5.CAF；6.GCG；7.ECG.

      Fig.2 Chromatogram of catechins in Century Green Tea PolyphenolⅠon Vertex AQ-C18column

      Mobile phase:A，methanol， B，0.05% trifluoro acetic acid solution； elution procedure: 22% A（4 min）11 min40% A（6 min）4 min22%A；detection wavelength:210 nm

      Peak identification:8.CG； others are same as in Fig.1.

      ◆ 样品制备

      茶 叶样　准确称取1 g左右的干茶叶样品于250 mL烧杯中，倒入200 mL左右已煮沸的超纯水，并把烧杯保温于95℃左右的热水浴中，每隔30s搅拌一次，持续浸提10 min。取出烧杯，适当冷却后用普通定性滤纸过滤，并用少量超纯水洗涤烧杯和残渣2~3次，过滤洗涤液，将滤液全部转入250mL容量瓶中。待瓶内溶液完 全冷至室温时，用水定容至刻度，摇匀。取此茶浸提液3.00 mL于10mL容量瓶中，用体积比为70∶30∶0.05的CH3OH-H2O-TFA混合液稀释至刻度，过滤后通过Sep-pakC18小柱，流出液用 0.5μm微孔膜过滤后作HPLC分析。

      茶多酚样　准确称取50 mg左右样品于100 mL容量瓶中，用体积比为1∶1的CH3OH-H2O混合溶液溶解并定容至刻度，通过Sep-pak C18小柱处理后，再用0.5μm微孔膜过滤，滤液供HPLC分析使用。

      ◆ 结论

      用杭州奥希的VERTEX STI 5000等度高效液相色谱仪分析茶叶及茶多酚中儿茶素，方便，准确，快速。
 

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